PCR-SSP tekniğine dayalı laboratuvar yapımı HLA-B*27 optimizasyonu ve test kiti geliştirilmesi

AAmaç: Çalışmada Ankilozan spondilit ve diğer spondiloartropatilerin moleküler tanısında kullanılmak üzere güvenilir, ekonomik ve rutin kullanıma uygun laboratuvar yapımı (in-house) HLA-B*27 PCR-SSP tanı kiti geliştirilmesi amaçlanmıştır. Gereç ve Yöntem: Çalışmaya, ticari kitler kullanılarak HLA-B*...

Full description

Bibliographic Details
Main Authors: Ramazan GÜNEŞAÇAR, Bekir Mehmet KELLECİ, Mehmet Yaşar ÖZKARS, İlkay ADANIR, Mustafa ÇELİK
Format: Article
Language:English
Published: Cukurova University 2018-12-01
Series:Cukurova Medical Journal
Subjects:
Online Access:https://dergipark.org.tr/tr/pub/cumj/issue/38921/429882?publisher=cu
_version_ 1797920713114386432
author Ramazan GÜNEŞAÇAR
Bekir Mehmet KELLECİ
Mehmet Yaşar ÖZKARS
İlkay ADANIR
Mustafa ÇELİK
author_facet Ramazan GÜNEŞAÇAR
Bekir Mehmet KELLECİ
Mehmet Yaşar ÖZKARS
İlkay ADANIR
Mustafa ÇELİK
author_sort Ramazan GÜNEŞAÇAR
collection DOAJ
description AAmaç: Çalışmada Ankilozan spondilit ve diğer spondiloartropatilerin moleküler tanısında kullanılmak üzere güvenilir, ekonomik ve rutin kullanıma uygun laboratuvar yapımı (in-house) HLA-B*27 PCR-SSP tanı kiti geliştirilmesi amaçlanmıştır. Gereç ve Yöntem: Çalışmaya, ticari kitler kullanılarak HLA-B*27 pozitif olarak saptanan 119 ve negatif olarak saptanan 446 olmak üzere toplam 565 olgu dahil edildi. HLA-B*27 tipleme için sekansa spesifik primerler ve beta globin gen bölgesinden yararlanılarak dizayn edilen internal kontrol primer çifti kullanılarak PCR optimizasyonu gerçekleştirildi. Bulgular: HLA-B*27’si pozitif olan olgularda, %2’lik agaroz jelinde 273 bç internal kontrol bandının ilerisinde 149 bç’lik spesifik bant olmak üzere çift bant, B*27 negatif hastalarda ise sadece 273 bç’lik internal kontrol bandı saptandı. Ticari kitler kullanılarak HLA-B*27’si pozitif olarak saptanan 119 ve negatif olarak saptanan 446 bireyin sonuçları ile tarafımızdan geliştirilen PCR-SSP kiti kullanılarak elde edilen sonuçların tamamen uyumlu olması nedeniyle sensitivite ve spesifite %100 olarak belirlendi. Geliştirdiğimiz laboratuvar yapımı PCR-SSP kitinin maliyetinin, ticari kitlere göre en az 50 kat daha ucuz olduğu görüldü. Sonuç: Ticari kitler kullanılarak HLA-B*27’si pozitif olarak saptanan 119 ve negatif olarak saptanan 446 olgunun tamamında, geliştirdiğimiz yöntemle de birebir uyumlu sonuçlar elde edildi. Bu bulgular geliştirdiğimiz kitin güvenilir, ekonomik ve rutin kullanıma uygun olduğunu göstermektedir.
first_indexed 2024-04-10T14:05:24Z
format Article
id doaj.art-437c37a52dc64802b57380ef713afb66
institution Directory Open Access Journal
issn 2602-3040
language English
last_indexed 2024-04-10T14:05:24Z
publishDate 2018-12-01
publisher Cukurova University
record_format Article
series Cukurova Medical Journal
spelling doaj.art-437c37a52dc64802b57380ef713afb662023-02-15T16:10:03ZengCukurova UniversityCukurova Medical Journal2602-30402018-12-0143Ek 124024710.17826/cumj.42988248PCR-SSP tekniğine dayalı laboratuvar yapımı HLA-B*27 optimizasyonu ve test kiti geliştirilmesiRamazan GÜNEŞAÇAR0Bekir Mehmet KELLECİ1Mehmet Yaşar ÖZKARS2İlkay ADANIR3Mustafa ÇELİK4KAHRAMANMARAŞ SÜTÇÜ İMAM ÜNİVERSİTESİ, TIP FAKÜLTESİ, TEMEL TIP BİLİMLERİ BÖLÜMÜ, FİZYOLOJİ ANABİLİM DALIKAHRAMANMARAŞ SÜTÇÜ İMAM ÜNİVERSİTESİ, TIP FAKÜLTESİ, TEMEL TIP BİLİMLERİ BÖLÜMÜ, FİZYOLOJİ ANABİLİM DALIKAHRAMANMARAŞ SÜTÇÜ İMAM ÜNİVERSİTESİ, TIP FAKÜLTESİ, DAHİLİ TIP BİLİMLERİ BÖLÜMÜ, ÇOCUK RUH SAĞLIĞI VE HASTALIKLARI ANABİLİM DALIKAHRAMANMARAŞ SÜTÇÜ İMAM ÜNİVERSİTESİ, TIP FAKÜLTESİ, TEMEL TIP BİLİMLERİ BÖLÜMÜ, FİZYOLOJİ ANABİLİM DALIKAHRAMANMARAŞ SÜTÇÜ İMAM ÜNİVERSİTESİ, TIP FAKÜLTESİ, TEMEL TIP BİLİMLERİ BÖLÜMÜ, FİZYOLOJİ ANABİLİM DALIAAmaç: Çalışmada Ankilozan spondilit ve diğer spondiloartropatilerin moleküler tanısında kullanılmak üzere güvenilir, ekonomik ve rutin kullanıma uygun laboratuvar yapımı (in-house) HLA-B*27 PCR-SSP tanı kiti geliştirilmesi amaçlanmıştır. Gereç ve Yöntem: Çalışmaya, ticari kitler kullanılarak HLA-B*27 pozitif olarak saptanan 119 ve negatif olarak saptanan 446 olmak üzere toplam 565 olgu dahil edildi. HLA-B*27 tipleme için sekansa spesifik primerler ve beta globin gen bölgesinden yararlanılarak dizayn edilen internal kontrol primer çifti kullanılarak PCR optimizasyonu gerçekleştirildi. Bulgular: HLA-B*27’si pozitif olan olgularda, %2’lik agaroz jelinde 273 bç internal kontrol bandının ilerisinde 149 bç’lik spesifik bant olmak üzere çift bant, B*27 negatif hastalarda ise sadece 273 bç’lik internal kontrol bandı saptandı. Ticari kitler kullanılarak HLA-B*27’si pozitif olarak saptanan 119 ve negatif olarak saptanan 446 bireyin sonuçları ile tarafımızdan geliştirilen PCR-SSP kiti kullanılarak elde edilen sonuçların tamamen uyumlu olması nedeniyle sensitivite ve spesifite %100 olarak belirlendi. Geliştirdiğimiz laboratuvar yapımı PCR-SSP kitinin maliyetinin, ticari kitlere göre en az 50 kat daha ucuz olduğu görüldü. Sonuç: Ticari kitler kullanılarak HLA-B*27’si pozitif olarak saptanan 119 ve negatif olarak saptanan 446 olgunun tamamında, geliştirdiğimiz yöntemle de birebir uyumlu sonuçlar elde edildi. Bu bulgular geliştirdiğimiz kitin güvenilir, ekonomik ve rutin kullanıma uygun olduğunu göstermektedir.https://dergipark.org.tr/tr/pub/cumj/issue/38921/429882?publisher=cuhla-b*27pcr-ssptest kit developmentankylosing spondylitisspondyloarthropathieshla-b*27pcr-ssptest kiti geliştirilmesiankilozan spondilitspondiloartropatiler
spellingShingle Ramazan GÜNEŞAÇAR
Bekir Mehmet KELLECİ
Mehmet Yaşar ÖZKARS
İlkay ADANIR
Mustafa ÇELİK
PCR-SSP tekniğine dayalı laboratuvar yapımı HLA-B*27 optimizasyonu ve test kiti geliştirilmesi
Cukurova Medical Journal
hla-b*27
pcr-ssp
test kit development
ankylosing spondylitis
spondyloarthropathies
hla-b*27
pcr-ssp
test kiti geliştirilmesi
ankilozan spondilit
spondiloartropatiler
title PCR-SSP tekniğine dayalı laboratuvar yapımı HLA-B*27 optimizasyonu ve test kiti geliştirilmesi
title_full PCR-SSP tekniğine dayalı laboratuvar yapımı HLA-B*27 optimizasyonu ve test kiti geliştirilmesi
title_fullStr PCR-SSP tekniğine dayalı laboratuvar yapımı HLA-B*27 optimizasyonu ve test kiti geliştirilmesi
title_full_unstemmed PCR-SSP tekniğine dayalı laboratuvar yapımı HLA-B*27 optimizasyonu ve test kiti geliştirilmesi
title_short PCR-SSP tekniğine dayalı laboratuvar yapımı HLA-B*27 optimizasyonu ve test kiti geliştirilmesi
title_sort pcr ssp teknigine dayali laboratuvar yapimi hla b 27 optimizasyonu ve test kiti gelistirilmesi
topic hla-b*27
pcr-ssp
test kit development
ankylosing spondylitis
spondyloarthropathies
hla-b*27
pcr-ssp
test kiti geliştirilmesi
ankilozan spondilit
spondiloartropatiler
url https://dergipark.org.tr/tr/pub/cumj/issue/38921/429882?publisher=cu
work_keys_str_mv AT ramazangunesacar pcrssptekniginedayalılaboratuvaryapımıhlab27optimizasyonuvetestkitigelistirilmesi
AT bekirmehmetkelleci pcrssptekniginedayalılaboratuvaryapımıhlab27optimizasyonuvetestkitigelistirilmesi
AT mehmetyasarozkars pcrssptekniginedayalılaboratuvaryapımıhlab27optimizasyonuvetestkitigelistirilmesi
AT ilkayadanir pcrssptekniginedayalılaboratuvaryapımıhlab27optimizasyonuvetestkitigelistirilmesi
AT mustafacelik pcrssptekniginedayalılaboratuvaryapımıhlab27optimizasyonuvetestkitigelistirilmesi