Técnica inmunocitoquímica para evaluar la proliferación de células en cultivo por la incorporación de romodeoxiuridina
Para evaluar la proliferacion in vitro de células, se estandarizó una técnica inmunocitoquimica no radioactiva. fácil de manejar, más rápida y segura que permite detectar la bromodeoxiuridina (BrdU) incorporada en las células que entran en fase S. Durante la estandarización de la técnica inmunocitoq...
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Instituto Nacional de Salud
2000-06-01
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author | Sonia Rahiran Zayra Garavito Hernán Hurtado |
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description | Para evaluar la proliferacion in vitro de células, se estandarizó una técnica inmunocitoquimica no radioactiva. fácil de manejar, más rápida y segura que permite detectar la bromodeoxiuridina (BrdU) incorporada en las células que entran en fase S. Durante la estandarización de la técnica inmunocitoquimica con peroxidasa, se usaron varios tipos celulares y se obtuvieron resultados similares. Brevemente, se realiza una incubación con BrdU durante 48 horas y luego, se procesa el material celular para una inmunocitoquimica convencional que tiene como paso adicional la desnaturalización del ADN con HCI previa a la incubación con el anticuerpo primario anti-BrdU. Como cromógeno se usó la DAB (diaminobenzidina) o el AEC (aminoetilcarbazol). El procedimiento utilizado permite ver una tinción especifica para núcleos en células que entran en fase S y permite evaluar rápidamente el porcentaje de células que están proliferando en el cultivo. |
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spelling | doaj.art-5b4be419b0884a789187db8bfa6fd59c2022-12-22T02:13:17ZengInstituto Nacional de SaludBiomédica: revista del Instituto Nacional de Salud0120-41570120-41572000-06-0120214415010.7705/biomedica.v20i2.1057812Técnica inmunocitoquímica para evaluar la proliferación de células en cultivo por la incorporación de romodeoxiuridinaSonia RahiranZayra GaravitoHernán HurtadoPara evaluar la proliferacion in vitro de células, se estandarizó una técnica inmunocitoquimica no radioactiva. fácil de manejar, más rápida y segura que permite detectar la bromodeoxiuridina (BrdU) incorporada en las células que entran en fase S. Durante la estandarización de la técnica inmunocitoquimica con peroxidasa, se usaron varios tipos celulares y se obtuvieron resultados similares. Brevemente, se realiza una incubación con BrdU durante 48 horas y luego, se procesa el material celular para una inmunocitoquimica convencional que tiene como paso adicional la desnaturalización del ADN con HCI previa a la incubación con el anticuerpo primario anti-BrdU. Como cromógeno se usó la DAB (diaminobenzidina) o el AEC (aminoetilcarbazol). El procedimiento utilizado permite ver una tinción especifica para núcleos en células que entran en fase S y permite evaluar rápidamente el porcentaje de células que están proliferando en el cultivo.http://www.revistabiomedica.org/index.php/biomedica/article/view/1057inmunocyitochemistrybromodeoxiuridinecell cultureSchwann cellscellular proliferation |
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