Uporaba oligonukleotidnih sond in pretočne citometrije za analizo bakterijske združbe v bioloških čistilnih sistemih

Proučevanje združbe mikroorganizmov v aktivnem blatu z obstoječimi mikrobiološkimi metodami predstavlja nerešljiv problem, kadar želimo ugotavljati ne le število vseh mikroorganizmov v vzorcu temveč tudi število bakterij specifičnih bakterijskih subpopulacij. Opisali smo metodo za hitro analiziranje...

Full description

Bibliographic Details
Main Authors: Luka LIPOGLAVŠEK, Gorazd AVGUŠTIN
Format: Article
Language:English
Published: University of Ljubljana Press (Založba Univerze v Ljubljani) 2000-05-01
Series:Acta Agriculturae Slovenica
Subjects:
Online Access:https://journals.uni-lj.si/aas/article/view/15790
_version_ 1826532232419868672
author Luka LIPOGLAVŠEK
Gorazd AVGUŠTIN
author_facet Luka LIPOGLAVŠEK
Gorazd AVGUŠTIN
author_sort Luka LIPOGLAVŠEK
collection DOAJ
description Proučevanje združbe mikroorganizmov v aktivnem blatu z obstoječimi mikrobiološkimi metodami predstavlja nerešljiv problem, kadar želimo ugotavljati ne le število vseh mikroorganizmov v vzorcu temveč tudi število bakterij specifičnih bakterijskih subpopulacij. Opisali smo metodo za hitro analiziranje aktivnega blata z uporabo dveh različno označenih oligonukleotidnih sond in pripadajočih detektorjev fluorescence pretočnega citometra. S pomočjo sond EUB338-Cy3 in fD1-FITC, specifičnih za vse bakterije, smo postavili model in ga preizkusili s 16S rRNK sondo NSO190-FITC, specifično za kemolitotrofne oksidatorje amonija iz b - podskupine proteobakterij. Ugotovili smo, da je bilo v vzorcu 16,3% bakterij, ki jih prepozna omenjena sonda. Kot možno izboljšavo smo preizkusili učinek tripansko modrega na avtofluorescenco in fluorescenco s sondami hibridiziranih celic. Tripansko modro zniža raven zelene avtofluorescence in nespecifične fluorescence, ne vpliva pa na fluorescenco specifično hibridiziranih celic.
first_indexed 2024-03-08T23:21:45Z
format Article
id doaj.art-67d0a60ce2cf4101b393d696b2d34263
institution Directory Open Access Journal
issn 1854-1941
language English
last_indexed 2025-03-14T01:47:58Z
publishDate 2000-05-01
publisher University of Ljubljana Press (Založba Univerze v Ljubljani)
record_format Article
series Acta Agriculturae Slovenica
spelling doaj.art-67d0a60ce2cf4101b393d696b2d342632025-03-12T12:22:20ZengUniversity of Ljubljana Press (Založba Univerze v Ljubljani)Acta Agriculturae Slovenica1854-19412000-05-0176111312210.14720/aas.2000.76.1.1579022183Uporaba oligonukleotidnih sond in pretočne citometrije za analizo bakterijske združbe v bioloških čistilnih sistemihLuka LIPOGLAVŠEK0Gorazd AVGUŠTIN1Univ. v Ljubljani, Biotehniška fak., Odd. za zootehniko, Groblje 3, SI-1230 Domžale, SlovenijaUniv. v Ljubljani, Biotehniška fak., Odd. za zootehniko, Groblje 3, SI-1230 Domžale, SlovenijaProučevanje združbe mikroorganizmov v aktivnem blatu z obstoječimi mikrobiološkimi metodami predstavlja nerešljiv problem, kadar želimo ugotavljati ne le število vseh mikroorganizmov v vzorcu temveč tudi število bakterij specifičnih bakterijskih subpopulacij. Opisali smo metodo za hitro analiziranje aktivnega blata z uporabo dveh različno označenih oligonukleotidnih sond in pripadajočih detektorjev fluorescence pretočnega citometra. S pomočjo sond EUB338-Cy3 in fD1-FITC, specifičnih za vse bakterije, smo postavili model in ga preizkusili s 16S rRNK sondo NSO190-FITC, specifično za kemolitotrofne oksidatorje amonija iz b - podskupine proteobakterij. Ugotovili smo, da je bilo v vzorcu 16,3% bakterij, ki jih prepozna omenjena sonda. Kot možno izboljšavo smo preizkusili učinek tripansko modrega na avtofluorescenco in fluorescenco s sondami hibridiziranih celic. Tripansko modro zniža raven zelene avtofluorescence in nespecifične fluorescence, ne vpliva pa na fluorescenco specifično hibridiziranih celic.https://journals.uni-lj.si/aas/article/view/15790čistilni sistemibiološki čistilni sistemiaktivno blatomikrobiologijabakterijeanalitske metoderrnk sondepretočna citometrijaoksidatorji amonija
spellingShingle Luka LIPOGLAVŠEK
Gorazd AVGUŠTIN
Uporaba oligonukleotidnih sond in pretočne citometrije za analizo bakterijske združbe v bioloških čistilnih sistemih
Acta Agriculturae Slovenica
čistilni sistemi
biološki čistilni sistemi
aktivno blato
mikrobiologija
bakterije
analitske metode
rrnk sonde
pretočna citometrija
oksidatorji amonija
title Uporaba oligonukleotidnih sond in pretočne citometrije za analizo bakterijske združbe v bioloških čistilnih sistemih
title_full Uporaba oligonukleotidnih sond in pretočne citometrije za analizo bakterijske združbe v bioloških čistilnih sistemih
title_fullStr Uporaba oligonukleotidnih sond in pretočne citometrije za analizo bakterijske združbe v bioloških čistilnih sistemih
title_full_unstemmed Uporaba oligonukleotidnih sond in pretočne citometrije za analizo bakterijske združbe v bioloških čistilnih sistemih
title_short Uporaba oligonukleotidnih sond in pretočne citometrije za analizo bakterijske združbe v bioloških čistilnih sistemih
title_sort uporaba oligonukleotidnih sond in pretocne citometrije za analizo bakterijske zdruzbe v bioloskih cistilnih sistemih
topic čistilni sistemi
biološki čistilni sistemi
aktivno blato
mikrobiologija
bakterije
analitske metode
rrnk sonde
pretočna citometrija
oksidatorji amonija
url https://journals.uni-lj.si/aas/article/view/15790
work_keys_str_mv AT lukalipoglavsek uporabaoligonukleotidnihsondinpretocnecitometrijezaanalizobakterijskezdruzbevbioloskihcistilnihsistemih
AT gorazdavgustin uporabaoligonukleotidnihsondinpretocnecitometrijezaanalizobakterijskezdruzbevbioloskihcistilnihsistemih