Mapa del proteoma de parásitos de Leishmania Viannia a partir de electroforesis de geles de poliacramida en dos dimensiones y otras técnicas asociadas

En este estudio demostramos el potencial de la electroforesis en dos dimensiones (2DE) como herramienta para la caracterización del proteoma de Leishmania (expresión proteica complementaria del genoma). Los proteomas por 2DE en el rango neutro (pH 5-7) de extractos solubles de promastigotes de Leish...

Full description

Bibliographic Details
Main Authors: Rafael Góngora, Nathalie Acestor, Manfredo Quadroni, Nicolas Fasel, Nancy G. Saravia, John Walker
Format: Article
Language:English
Published: Instituto Nacional de Salud 2003-06-01
Series:Biomédica: revista del Instituto Nacional de Salud
Subjects:
Online Access:http://www.revistabiomedica.org/index.php/biomedica/article/view/1207
_version_ 1818499865130303488
author Rafael Góngora
Nathalie Acestor
Manfredo Quadroni
Nicolas Fasel
Nancy G. Saravia
John Walker
author_facet Rafael Góngora
Nathalie Acestor
Manfredo Quadroni
Nicolas Fasel
Nancy G. Saravia
John Walker
author_sort Rafael Góngora
collection DOAJ
description En este estudio demostramos el potencial de la electroforesis en dos dimensiones (2DE) como herramienta para la caracterización del proteoma de Leishmania (expresión proteica complementaria del genoma). Los proteomas por 2DE en el rango neutro (pH 5-7) de extractos solubles de promastigotes de Leishmania (Viannia) guyanensis y Leishmania (Viannia) panamensis fueron reproducibles usando tampón de lisis de urea y nonidet P-40. Con la tinción de azul de Coomassie y nitrato de plata se detectaron, con buena resolución, 800 y 1.500 puntos de proteínas, respectivamente. Entre las proteínas de referencia comunes, aisladas de los proteomas de las cepas estudiadas, se identificaron por medio de espectrometría de masa de péptidos (LC-ES-MS/MS) y métodos bioinformáticos, proteínas de choque térmico, proteína ribosomal S12, proteína de membrana del cinetoplasto 11 y una proteína hipotética específica de Leishmania de 13 kDa con función desconocida. Por inmunoblot y utilizando un anticuerpo monoclonal, se detectaron específicamente las proteínas paraflagelar 1 y 2 de 81,4 kDa y 77,5 kDa, respectivamente. La expresión proteica diferencial encontrada en los distintos clones de parásitos fueron reproducibles al ser comparados por medio de un programa analizador de imágenes. Estos datos demuestran el poder de resolución del análisis de proteomas por 2DE. La producción y caracterización de mapas proteicos básicos de Leishmania con buena calidad constituye un paso esencial en los estudios proteómicos comparativos orientados a la identificación de factores moleculares involucrados en la resistencia a drogas, virulencia de parásitos y el descubrimiento de blancos para nuevas drogas y vacunas.
first_indexed 2024-12-10T20:35:25Z
format Article
id doaj.art-6f3e1b79a788477d8c781e945f5047b9
institution Directory Open Access Journal
issn 0120-4157
0120-4157
language English
last_indexed 2024-12-10T20:35:25Z
publishDate 2003-06-01
publisher Instituto Nacional de Salud
record_format Article
series Biomédica: revista del Instituto Nacional de Salud
spelling doaj.art-6f3e1b79a788477d8c781e945f5047b92022-12-22T01:34:33ZengInstituto Nacional de SaludBiomédica: revista del Instituto Nacional de Salud0120-41570120-41572003-06-012321536010.7705/biomedica.v23i2.1207962Mapa del proteoma de parásitos de Leishmania Viannia a partir de electroforesis de geles de poliacramida en dos dimensiones y otras técnicas asociadasRafael GóngoraNathalie AcestorManfredo QuadroniNicolas FaselNancy G. SaraviaJohn WalkerEn este estudio demostramos el potencial de la electroforesis en dos dimensiones (2DE) como herramienta para la caracterización del proteoma de Leishmania (expresión proteica complementaria del genoma). Los proteomas por 2DE en el rango neutro (pH 5-7) de extractos solubles de promastigotes de Leishmania (Viannia) guyanensis y Leishmania (Viannia) panamensis fueron reproducibles usando tampón de lisis de urea y nonidet P-40. Con la tinción de azul de Coomassie y nitrato de plata se detectaron, con buena resolución, 800 y 1.500 puntos de proteínas, respectivamente. Entre las proteínas de referencia comunes, aisladas de los proteomas de las cepas estudiadas, se identificaron por medio de espectrometría de masa de péptidos (LC-ES-MS/MS) y métodos bioinformáticos, proteínas de choque térmico, proteína ribosomal S12, proteína de membrana del cinetoplasto 11 y una proteína hipotética específica de Leishmania de 13 kDa con función desconocida. Por inmunoblot y utilizando un anticuerpo monoclonal, se detectaron específicamente las proteínas paraflagelar 1 y 2 de 81,4 kDa y 77,5 kDa, respectivamente. La expresión proteica diferencial encontrada en los distintos clones de parásitos fueron reproducibles al ser comparados por medio de un programa analizador de imágenes. Estos datos demuestran el poder de resolución del análisis de proteomas por 2DE. La producción y caracterización de mapas proteicos básicos de Leishmania con buena calidad constituye un paso esencial en los estudios proteómicos comparativos orientados a la identificación de factores moleculares involucrados en la resistencia a drogas, virulencia de parásitos y el descubrimiento de blancos para nuevas drogas y vacunas.http://www.revistabiomedica.org/index.php/biomedica/article/view/1207proteomicsproteomeleishmaniatwo-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis
spellingShingle Rafael Góngora
Nathalie Acestor
Manfredo Quadroni
Nicolas Fasel
Nancy G. Saravia
John Walker
Mapa del proteoma de parásitos de Leishmania Viannia a partir de electroforesis de geles de poliacramida en dos dimensiones y otras técnicas asociadas
Biomédica: revista del Instituto Nacional de Salud
proteomics
proteome
leishmania
two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis
title Mapa del proteoma de parásitos de Leishmania Viannia a partir de electroforesis de geles de poliacramida en dos dimensiones y otras técnicas asociadas
title_full Mapa del proteoma de parásitos de Leishmania Viannia a partir de electroforesis de geles de poliacramida en dos dimensiones y otras técnicas asociadas
title_fullStr Mapa del proteoma de parásitos de Leishmania Viannia a partir de electroforesis de geles de poliacramida en dos dimensiones y otras técnicas asociadas
title_full_unstemmed Mapa del proteoma de parásitos de Leishmania Viannia a partir de electroforesis de geles de poliacramida en dos dimensiones y otras técnicas asociadas
title_short Mapa del proteoma de parásitos de Leishmania Viannia a partir de electroforesis de geles de poliacramida en dos dimensiones y otras técnicas asociadas
title_sort mapa del proteoma de parasitos de leishmania viannia a partir de electroforesis de geles de poliacramida en dos dimensiones y otras tecnicas asociadas
topic proteomics
proteome
leishmania
two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis
url http://www.revistabiomedica.org/index.php/biomedica/article/view/1207
work_keys_str_mv AT rafaelgongora mapadelproteomadeparasitosdeleishmaniavianniaapartirdeelectroforesisdegelesdepoliacramidaendosdimensionesyotrastecnicasasociadas
AT nathalieacestor mapadelproteomadeparasitosdeleishmaniavianniaapartirdeelectroforesisdegelesdepoliacramidaendosdimensionesyotrastecnicasasociadas
AT manfredoquadroni mapadelproteomadeparasitosdeleishmaniavianniaapartirdeelectroforesisdegelesdepoliacramidaendosdimensionesyotrastecnicasasociadas
AT nicolasfasel mapadelproteomadeparasitosdeleishmaniavianniaapartirdeelectroforesisdegelesdepoliacramidaendosdimensionesyotrastecnicasasociadas
AT nancygsaravia mapadelproteomadeparasitosdeleishmaniavianniaapartirdeelectroforesisdegelesdepoliacramidaendosdimensionesyotrastecnicasasociadas
AT johnwalker mapadelproteomadeparasitosdeleishmaniavianniaapartirdeelectroforesisdegelesdepoliacramidaendosdimensionesyotrastecnicasasociadas