تولید پلیهیدروکسیبوتیرات با استفاده از عصارۀ آنزیمیآزوسپریلومبرازیلنس در محیط عاری از سلول
مقدمه: پلیهیدروکسیآلکانواتها (PHAS) پلیمرهای باکتریایی هستند که معمولاً بهعنوان پلیاستر ذخیرهای توسط طیف گستردهای از میکروارگانیسمها تحت شرایط عدمتعادل مواد غذایی ساخته میشوند و خواص مکانیکی پلیهیدروکسیآلکانواتها آنها را جهت جایگزینی با پلاستیکهای تولیدشده از مواد پتروشیمی مشابه مناسب...
Main Authors: | , , |
---|---|
Format: | Article |
Language: | English |
Published: |
University of Isfahan
2017-06-01
|
Series: | Biological Journal of Microorganism |
Subjects: | |
Online Access: | http://bjm.ui.ac.ir/article_21567_f90087f9fe0e16ff813536b0960df6d9.pdf |
_version_ | 1811253143917297664 |
---|---|
author | سهیلا عباسی گیتی امتیازی رسول روغنیان |
author_facet | سهیلا عباسی گیتی امتیازی رسول روغنیان |
author_sort | سهیلا عباسی |
collection | DOAJ |
description | مقدمه: پلیهیدروکسیآلکانواتها (PHAS) پلیمرهای باکتریایی هستند که معمولاً بهعنوان پلیاستر ذخیرهای توسط طیف گستردهای از میکروارگانیسمها تحت شرایط عدمتعادل مواد غذایی ساخته میشوند و خواص مکانیکی پلیهیدروکسیآلکانواتها آنها را جهت جایگزینی با پلاستیکهای تولیدشده از مواد پتروشیمی مشابه مناسب ساخته است.؛اما برخلاف پلاستیکهای رایج در طبیعت بهطور کامل به CO2 و H2O تبدیل میشود. PHA میتواند بهوسیلۀ روشهای بیوتکنولوژی تحت شرایط کنترلشده تولید شود. مواد و روشها: ابتدا یک سوسپانسیون میکروبی غنی از PHB آماده شد و پس از شکستن سلولها و اطمینان از نبودِ سلول زنده، به محیط حداقل یا محیط M9 اضافه شد. سپس کدورت نمونه در طولموج 600 نانومتر اندازهگیری شد و انکوباسیون در 30 درجه سلسیوس و rpm 120 صورت گرفت. بعد از طی مدتزمان تعیینشده کدورت محلول و میزان PHB موجود در محیط اندازهگیری شد و از مقدار شاهد کسر گردید. میزان گلوکز محیط نیز اندازهگیری شد؛ سپس روی نمونۀ PHB استخراجشده آنالیزهای فیزیکی و شیمیایی جذب UV، FTIR، HPLC و HNMR1 انجام شد و با نمونۀ استاندارد مقایسه گردید. نتایج: در آزمایشهای انجامشده در دوازده روز متوالی از روز سوم میزان پلیهیدروکسیبوتیرات قابلِاندازهگیری بود. و در روز دهم بیشترین مقدار پلیهیدروکسیبوتیرات که 3/0 گرم در صد بود حاصل شد و بعد از آن میزان پلیهیدروکسیبوتیرات ثابت ماند. در ضمن میزان قند نمونه هر روز کاهش پیدا میکرد و در روز دهم به مقدار 2/0 گرمبرلیتر رسید، آنالیز فیزیکوشیمیایی نیز تولید پلیهیدروکسیبوتیرات را تأیید کرد. بحث و نتیجهگیری: در این پژوهش آزمایش با استفاده از کلیۀ آنزیمهای باکتری در خارج از سلول انجام گرفت با توجه به نتایج بهدستآمده در این پژوهش بازده واکنش 5/37درصد است که با خالصسازی آنزیم و استفاده از سوبسترای اختصاصی و بهینهکردن شرایط آنزیم میتوان تولید PHB را بهطور مستمر در خارج از سلول ادامه داد. |
first_indexed | 2024-04-12T16:45:18Z |
format | Article |
id | doaj.art-825886efd62f44ff83ced6a6e898fbe0 |
institution | Directory Open Access Journal |
issn | 2322-5173 2322-5181 |
language | English |
last_indexed | 2024-04-12T16:45:18Z |
publishDate | 2017-06-01 |
publisher | University of Isfahan |
record_format | Article |
series | Biological Journal of Microorganism |
spelling | doaj.art-825886efd62f44ff83ced6a6e898fbe02022-12-22T03:24:36ZengUniversity of IsfahanBiological Journal of Microorganism2322-51732322-51812017-06-0162212714221567تولید پلیهیدروکسیبوتیرات با استفاده از عصارۀ آنزیمیآزوسپریلومبرازیلنس در محیط عاری از سلولسهیلا عباسی0گیتی امتیازی1رسول روغنیان2دانشجوی کارشناسی ارشد میکروبشناسی، دانشگاه اصفهان، ایراناستاد میکروبشناسی، دانشگاه اصفهان، ایراناستاد میکروبشناسی، دانشگاه اصفهان، ایرانمقدمه: پلیهیدروکسیآلکانواتها (PHAS) پلیمرهای باکتریایی هستند که معمولاً بهعنوان پلیاستر ذخیرهای توسط طیف گستردهای از میکروارگانیسمها تحت شرایط عدمتعادل مواد غذایی ساخته میشوند و خواص مکانیکی پلیهیدروکسیآلکانواتها آنها را جهت جایگزینی با پلاستیکهای تولیدشده از مواد پتروشیمی مشابه مناسب ساخته است.؛اما برخلاف پلاستیکهای رایج در طبیعت بهطور کامل به CO2 و H2O تبدیل میشود. PHA میتواند بهوسیلۀ روشهای بیوتکنولوژی تحت شرایط کنترلشده تولید شود. مواد و روشها: ابتدا یک سوسپانسیون میکروبی غنی از PHB آماده شد و پس از شکستن سلولها و اطمینان از نبودِ سلول زنده، به محیط حداقل یا محیط M9 اضافه شد. سپس کدورت نمونه در طولموج 600 نانومتر اندازهگیری شد و انکوباسیون در 30 درجه سلسیوس و rpm 120 صورت گرفت. بعد از طی مدتزمان تعیینشده کدورت محلول و میزان PHB موجود در محیط اندازهگیری شد و از مقدار شاهد کسر گردید. میزان گلوکز محیط نیز اندازهگیری شد؛ سپس روی نمونۀ PHB استخراجشده آنالیزهای فیزیکی و شیمیایی جذب UV، FTIR، HPLC و HNMR1 انجام شد و با نمونۀ استاندارد مقایسه گردید. نتایج: در آزمایشهای انجامشده در دوازده روز متوالی از روز سوم میزان پلیهیدروکسیبوتیرات قابلِاندازهگیری بود. و در روز دهم بیشترین مقدار پلیهیدروکسیبوتیرات که 3/0 گرم در صد بود حاصل شد و بعد از آن میزان پلیهیدروکسیبوتیرات ثابت ماند. در ضمن میزان قند نمونه هر روز کاهش پیدا میکرد و در روز دهم به مقدار 2/0 گرمبرلیتر رسید، آنالیز فیزیکوشیمیایی نیز تولید پلیهیدروکسیبوتیرات را تأیید کرد. بحث و نتیجهگیری: در این پژوهش آزمایش با استفاده از کلیۀ آنزیمهای باکتری در خارج از سلول انجام گرفت با توجه به نتایج بهدستآمده در این پژوهش بازده واکنش 5/37درصد است که با خالصسازی آنزیم و استفاده از سوبسترای اختصاصی و بهینهکردن شرایط آنزیم میتوان تولید PHB را بهطور مستمر در خارج از سلول ادامه داد.http://bjm.ui.ac.ir/article_21567_f90087f9fe0e16ff813536b0960df6d9.pdfPHBپلیاسترآزوسپریلومبرازیلنسHPLCNMRFTIR |
spellingShingle | سهیلا عباسی گیتی امتیازی رسول روغنیان تولید پلیهیدروکسیبوتیرات با استفاده از عصارۀ آنزیمیآزوسپریلومبرازیلنس در محیط عاری از سلول Biological Journal of Microorganism PHB پلیاستر آزوسپریلومبرازیلنس HPLC NMR FTIR |
title | تولید پلیهیدروکسیبوتیرات با استفاده از عصارۀ آنزیمیآزوسپریلومبرازیلنس در محیط عاری از سلول |
title_full | تولید پلیهیدروکسیبوتیرات با استفاده از عصارۀ آنزیمیآزوسپریلومبرازیلنس در محیط عاری از سلول |
title_fullStr | تولید پلیهیدروکسیبوتیرات با استفاده از عصارۀ آنزیمیآزوسپریلومبرازیلنس در محیط عاری از سلول |
title_full_unstemmed | تولید پلیهیدروکسیبوتیرات با استفاده از عصارۀ آنزیمیآزوسپریلومبرازیلنس در محیط عاری از سلول |
title_short | تولید پلیهیدروکسیبوتیرات با استفاده از عصارۀ آنزیمیآزوسپریلومبرازیلنس در محیط عاری از سلول |
title_sort | تولید پلیهیدروکسیبوتیرات با استفاده از عصارۀ آنزیمیآزوسپریلومبرازیلنس در محیط عاری از سلول |
topic | PHB پلیاستر آزوسپریلومبرازیلنس HPLC NMR FTIR |
url | http://bjm.ui.ac.ir/article_21567_f90087f9fe0e16ff813536b0960df6d9.pdf |
work_keys_str_mv | AT shylạʿbạsy twlydplyhydrwḵsybwtyrạtbạạstfạdhạzʿṣạrەậnzymyậzwsprylwmbrạzylnsdrmḥyṭʿạryạzslwl AT gytyạmtyạzy twlydplyhydrwḵsybwtyrạtbạạstfạdhạzʿṣạrەậnzymyậzwsprylwmbrạzylnsdrmḥyṭʿạryạzslwl AT rswlrwgẖnyạn twlydplyhydrwḵsybwtyrạtbạạstfạdhạzʿṣạrەậnzymyậzwsprylwmbrạzylnsdrmḥyṭʿạryạzslwl |