Protocolo estándar para tipificar Pasteurella multocida mediante electroforesis de campos pulsantes en minigeles
Pasteurella multocida es una bacteria bacilar, Gram negativa, causante de enfermedades del tracto respiratorio superior de animales de cría intensiva, lo que provoca grandes pérdidas económicas a nivel mundial. La Electroforesis de Campo Pulsante (ECP) es la técnica “estándar de oro” para la tipific...
Main Authors: | , |
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Format: | Article |
Language: | English |
Published: |
Centro Nacional de Investigaciones Científicas
2022-01-01
|
Series: | Revista CENIC. Ciencias Biológicas |
Online Access: | https://revista.cnic.cu/index.php/RevBiol/article/view/1218 |
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author | Heidi a Quintero Alvarez Karen León Arcia |
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description | Pasteurella multocida es una bacteria bacilar, Gram negativa, causante de enfermedades del tracto respiratorio superior de animales de cría intensiva, lo que provoca grandes pérdidas económicas a nivel mundial. La Electroforesis de Campo Pulsante (ECP) es la técnica “estándar de oro” para la tipificación molecular de las cepas involucradas en brotes epidemiológicos. Sin embargo, no se ha reportado un protocolo estándar rápido para la tipificación de P. multocida. En el presente trabajo se estandarizaron los parámetros de Tiempo de Pulso y Cantidad de Pulso para separar los fragmentos de restricción del genoma de P. multocida en las minicámaras del Sistema Guefast06. Los patrones de bandas se obtuvieron luego de 5h de electroforesis, en contraste con las 20-40h reportadas previamente. Estos patrones obtenidos con el Guefast06 fueron comparables a los reportados en la literatura porque se logró isorresolución de las bandas de ADN. Además, se determinó que diferentes cepas de P. multocida se pueden discriminar cuando se usan tanto la enzima Apa I como Asc I para generar dichos patrones de bandas. Estas condiciones experimentales pudieran ser ventajosas para la investigación de brotes infecciosos pues permitirían a los expertos la toma de decisiones oportunas en menor tiempo |
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publisher | Centro Nacional de Investigaciones Científicas |
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spelling | doaj.art-a75b052ddee0497890a9873ae6be4f1c2023-08-23T18:10:11ZengCentro Nacional de Investigaciones CientíficasRevista CENIC. Ciencias Biológicas0253-56882221-24502022-01-015310690791380Protocolo estándar para tipificar Pasteurella multocida mediante electroforesis de campos pulsantes en minigelesHeidi a Quintero Alvarez0Karen León Arcia1Centro de Neurociencias de CubaCentro de Neurociencias de CubaPasteurella multocida es una bacteria bacilar, Gram negativa, causante de enfermedades del tracto respiratorio superior de animales de cría intensiva, lo que provoca grandes pérdidas económicas a nivel mundial. La Electroforesis de Campo Pulsante (ECP) es la técnica “estándar de oro” para la tipificación molecular de las cepas involucradas en brotes epidemiológicos. Sin embargo, no se ha reportado un protocolo estándar rápido para la tipificación de P. multocida. En el presente trabajo se estandarizaron los parámetros de Tiempo de Pulso y Cantidad de Pulso para separar los fragmentos de restricción del genoma de P. multocida en las minicámaras del Sistema Guefast06. Los patrones de bandas se obtuvieron luego de 5h de electroforesis, en contraste con las 20-40h reportadas previamente. Estos patrones obtenidos con el Guefast06 fueron comparables a los reportados en la literatura porque se logró isorresolución de las bandas de ADN. Además, se determinó que diferentes cepas de P. multocida se pueden discriminar cuando se usan tanto la enzima Apa I como Asc I para generar dichos patrones de bandas. Estas condiciones experimentales pudieran ser ventajosas para la investigación de brotes infecciosos pues permitirían a los expertos la toma de decisiones oportunas en menor tiempohttps://revista.cnic.cu/index.php/RevBiol/article/view/1218 |
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