Genótipo e expressão da proteína fluorescente verde melhorada em ratos da linhagem LEW-Tg (EGFP) F455.5/Rrrc
A proteína fluorescente verde (GFP) foi descrita pela primeira vez após ter sido extraída de Aequorea victoria em 1987. Desde então, a GFP e seus derivados têm sido amplamente utilizados em várias experiências como marcador celular e de proteínas. O objetivo do presente estudo foi o de verificar o g...
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|---|---|
| Format: | Article |
| Language: | English |
| Published: |
Universidade de São Paulo
2013-04-01
|
| Series: | Brazilian Journal of Veterinary Research and Animal Science |
| Subjects: | |
| Online Access: | http://www.revistas.usp.br/bjvras/article/view/61215 |
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| author | Renata Cristina Higino Brito Juliana Lott de Carvalho Alessandra Arcoverde Cavalcanti Zonari Natalia Martins Breyner Luiza Carvalho Dawidson Assis Gomes Alfredo Miranda Goes |
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| author_sort | Renata Cristina Higino Brito |
| collection | DOAJ |
| description | A proteína fluorescente verde (GFP) foi descrita pela primeira vez após ter sido extraída de Aequorea victoria em 1987. Desde então, a GFP e seus derivados têm sido amplamente utilizados em várias experiências como marcador celular e de proteínas. O objetivo do presente estudo foi o de verificar o genótipo dos descendentes de cruzamentos entre ratos Lewis LEW-Tg (EGFP) F455.5/Rrrc heterozigotos e de analisar a expressão da proteína fluorescente verde melhorada (EGFP) em diferentes tipos celulares e genótipos. O genótipo da descendência foi avaliado por PCR e pela análise da expressão da EGFP em diferentes células e genótipos, incluindo-se as células-tronco mesenquimais (MSC) derivadas de tecido adiposo e de osteoblastos de calvária. A expressão da EGFP foi verificada por citometria de fluxo, microscopia de fluorescência e imunocoloração. Foram, identificados os genótipos da descendência e determinados os níveis de expressão de EGFP em dois tipos de células. Foi também constatada uma diferença de expressão entre os genótipos (EGFP +/+) e (EGFP +/-) além da presença de autofluorescência. Mais estudos são necessários para esclarecer a fluorescência natural de células com o genótipo (EGFP +/-) e aquela induzida pela presença da EGFP. |
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| institution | Directory Open Access Journal |
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| publishDate | 2013-04-01 |
| publisher | Universidade de São Paulo |
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| series | Brazilian Journal of Veterinary Research and Animal Science |
| spelling | doaj.art-b6e3699cd30748f2b4d0b6a9c24a71b22022-12-21T23:20:50ZengUniversidade de São PauloBrazilian Journal of Veterinary Research and Animal Science1413-95961678-44562013-04-0150210.11606/issn.2318-3659.v50i2p87-9759925Genótipo e expressão da proteína fluorescente verde melhorada em ratos da linhagem LEW-Tg (EGFP) F455.5/RrrcRenata Cristina Higino Brito0Juliana Lott de Carvalho1Alessandra Arcoverde Cavalcanti Zonari2Natalia Martins Breyner3Luiza Carvalho4Dawidson Assis Gomes5Alfredo Miranda Goes6Universidade Federal de Minas Gerais, Departamento de Bioquímica e Imunologia, Laboratório de Imunologia Celular e Molecular, Belo Horizonte, MGUniversidade Federal de Minas Gerais, Departamento de Bioquímica e Imunologia, Laboratório de Imunologia Celular e Molecular, Belo Horizonte, MGUniversidade Federal de Minas Gerais, Departamento de Bioquímica e Imunologia, Laboratório de Imunologia Celular e Molecular, Belo Horizonte, MGUniversidade Federal de Minas Gerais, Departamento de Bioquímica e Imunologia, Laboratório de Imunologia Celular e Molecular, Belo Horizonte, MGUniversidade Federal de Minas Gerais, Departamento de Bioquímica e Imunologia, Laboratório de Imunologia Celular e Molecular, Belo Horizonte, MGUniversidade Federal de Minas Gerais, Departamento de Bioquímica e Imunologia, Laboratório de Imunologia Celular e Molecular, Belo Horizonte, MGUniversidade Federal de Minas Gerais, Departamento de Bioquímica e Imunologia, Laboratório de Imunologia Celular e Molecular, Belo Horizonte, MGA proteína fluorescente verde (GFP) foi descrita pela primeira vez após ter sido extraída de Aequorea victoria em 1987. Desde então, a GFP e seus derivados têm sido amplamente utilizados em várias experiências como marcador celular e de proteínas. O objetivo do presente estudo foi o de verificar o genótipo dos descendentes de cruzamentos entre ratos Lewis LEW-Tg (EGFP) F455.5/Rrrc heterozigotos e de analisar a expressão da proteína fluorescente verde melhorada (EGFP) em diferentes tipos celulares e genótipos. O genótipo da descendência foi avaliado por PCR e pela análise da expressão da EGFP em diferentes células e genótipos, incluindo-se as células-tronco mesenquimais (MSC) derivadas de tecido adiposo e de osteoblastos de calvária. A expressão da EGFP foi verificada por citometria de fluxo, microscopia de fluorescência e imunocoloração. Foram, identificados os genótipos da descendência e determinados os níveis de expressão de EGFP em dois tipos de células. Foi também constatada uma diferença de expressão entre os genótipos (EGFP +/+) e (EGFP +/-) além da presença de autofluorescência. Mais estudos são necessários para esclarecer a fluorescência natural de células com o genótipo (EGFP +/-) e aquela induzida pela presença da EGFP.http://www.revistas.usp.br/bjvras/article/view/61215Proteína verde fluorescente melhorada (EGFP)AutofluorescênciaDiferença de expressão |
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