Comparación de tres metodologías de aislamiento, purificación y cultivo in vitro de linfocitos T murinos
El aislamiento y selección de linfocitos T puros de cultivo primario de bazo de ratón puede obtenerse de manera rápida y fácil utilizando kits comerciales con microesferas magnéticas para capturar y purificar las células. A pesar de estas ventajas, la carga financiera que puede representar para el...
| Main Authors: | , , , , , |
|---|---|
| Format: | Article |
| Language: | Spanish |
| Published: |
Instituto Tecnológico de Costa Rica
2019-05-01
|
| Series: | Tecnología en Marcha |
| Subjects: | |
| Online Access: | https://revistas.tec.ac.cr/index.php/tec_marcha/article/view/4352 |
| _version_ | 1811166878179000320 |
|---|---|
| author | María I Chaves-Rodríguez Johan E. Morales-Sánchez Nazareth Mata-Rojas Laura A. Calvo-Castro Erick Hernández-Carvajal Randall Loaiza-Montoya |
| author_facet | María I Chaves-Rodríguez Johan E. Morales-Sánchez Nazareth Mata-Rojas Laura A. Calvo-Castro Erick Hernández-Carvajal Randall Loaiza-Montoya |
| author_sort | María I Chaves-Rodríguez |
| collection | DOAJ |
| description |
El aislamiento y selección de linfocitos T puros de cultivo primario de bazo de ratón puede obtenerse de manera rápida y fácil utilizando kits comerciales con microesferas magnéticas para capturar y purificar las células. A pesar de estas ventajas, la carga financiera que puede representar para el presupuesto de un laboratorio, la adquisición constante de estos kits justifica la evaluación de otras opciones de menor costo. Por ello, se comparó el porcentaje de recuperación celular, viabilidad y pureza de tres métodos de aislamiento y purificación de linfocitos T; dos de bajo costo y fácil implementación (aislamiento con amortiguador de amonio- cloruro-potasio (ACK)-adhesión celular y aislamiento con Ficoll), y un kit comercial de selección negativa con microesferas magnéticas. Con el método de amortiguador ACK-adhesión celular se obtuvo un porcentaje de recuperación y purificación de linfocitos T viables comparable al obtenido con el kit. Aunque este método requiere más tiempo, dado que las células deben ser incubadas durante toda la noche, es de fácil implementación y tiene una eficiencia comparable al kit, así como un menor costo. Este método puede ser tomado en cuenta para utilizar en experimentos que puedan trabajar con linfocitos activados.
|
| first_indexed | 2024-04-10T15:59:39Z |
| format | Article |
| id | doaj.art-bddf96de3e7d48f5855bd12c2d5b7702 |
| institution | Directory Open Access Journal |
| issn | 0379-3982 2215-3241 |
| language | Spanish |
| last_indexed | 2024-04-10T15:59:39Z |
| publishDate | 2019-05-01 |
| publisher | Instituto Tecnológico de Costa Rica |
| record_format | Article |
| series | Tecnología en Marcha |
| spelling | doaj.art-bddf96de3e7d48f5855bd12c2d5b77022023-02-10T14:26:36ZspaInstituto Tecnológico de Costa RicaTecnología en Marcha0379-39822215-32412019-05-0132210.18845/tm.v32i2.43523719Comparación de tres metodologías de aislamiento, purificación y cultivo in vitro de linfocitos T murinosMaría I Chaves-RodríguezJohan E. Morales-SánchezNazareth Mata-RojasLaura A. Calvo-CastroErick Hernández-CarvajalRandall Loaiza-Montoya El aislamiento y selección de linfocitos T puros de cultivo primario de bazo de ratón puede obtenerse de manera rápida y fácil utilizando kits comerciales con microesferas magnéticas para capturar y purificar las células. A pesar de estas ventajas, la carga financiera que puede representar para el presupuesto de un laboratorio, la adquisición constante de estos kits justifica la evaluación de otras opciones de menor costo. Por ello, se comparó el porcentaje de recuperación celular, viabilidad y pureza de tres métodos de aislamiento y purificación de linfocitos T; dos de bajo costo y fácil implementación (aislamiento con amortiguador de amonio- cloruro-potasio (ACK)-adhesión celular y aislamiento con Ficoll), y un kit comercial de selección negativa con microesferas magnéticas. Con el método de amortiguador ACK-adhesión celular se obtuvo un porcentaje de recuperación y purificación de linfocitos T viables comparable al obtenido con el kit. Aunque este método requiere más tiempo, dado que las células deben ser incubadas durante toda la noche, es de fácil implementación y tiene una eficiencia comparable al kit, así como un menor costo. Este método puede ser tomado en cuenta para utilizar en experimentos que puedan trabajar con linfocitos activados. https://revistas.tec.ac.cr/index.php/tec_marcha/article/view/4352CD3amortiguador ACKadherencia celularFicollmicroesferas magnéticas |
| spellingShingle | María I Chaves-Rodríguez Johan E. Morales-Sánchez Nazareth Mata-Rojas Laura A. Calvo-Castro Erick Hernández-Carvajal Randall Loaiza-Montoya Comparación de tres metodologías de aislamiento, purificación y cultivo in vitro de linfocitos T murinos Tecnología en Marcha CD3 amortiguador ACK adherencia celular Ficoll microesferas magnéticas |
| title | Comparación de tres metodologías de aislamiento, purificación y cultivo in vitro de linfocitos T murinos |
| title_full | Comparación de tres metodologías de aislamiento, purificación y cultivo in vitro de linfocitos T murinos |
| title_fullStr | Comparación de tres metodologías de aislamiento, purificación y cultivo in vitro de linfocitos T murinos |
| title_full_unstemmed | Comparación de tres metodologías de aislamiento, purificación y cultivo in vitro de linfocitos T murinos |
| title_short | Comparación de tres metodologías de aislamiento, purificación y cultivo in vitro de linfocitos T murinos |
| title_sort | comparacion de tres metodologias de aislamiento purificacion y cultivo in vitro de linfocitos t murinos |
| topic | CD3 amortiguador ACK adherencia celular Ficoll microesferas magnéticas |
| url | https://revistas.tec.ac.cr/index.php/tec_marcha/article/view/4352 |
| work_keys_str_mv | AT mariaichavesrodriguez comparaciondetresmetodologiasdeaislamientopurificacionycultivoinvitrodelinfocitostmurinos AT johanemoralessanchez comparaciondetresmetodologiasdeaislamientopurificacionycultivoinvitrodelinfocitostmurinos AT nazarethmatarojas comparaciondetresmetodologiasdeaislamientopurificacionycultivoinvitrodelinfocitostmurinos AT lauraacalvocastro comparaciondetresmetodologiasdeaislamientopurificacionycultivoinvitrodelinfocitostmurinos AT erickhernandezcarvajal comparaciondetresmetodologiasdeaislamientopurificacionycultivoinvitrodelinfocitostmurinos AT randallloaizamontoya comparaciondetresmetodologiasdeaislamientopurificacionycultivoinvitrodelinfocitostmurinos |