ALTERNATIVAS CROMATOGRÁFICAS PARA LA REMOCIÓN DE ENDOTOXINAS RESIDUALES EN EL PROCESO DE PURIFICACIÓN DE INMUNOGLOBULINAS HUMANAS
Se evaluaron, dos alternativas cromatográficas de intercambio iónico en modo negativo, a escala de laboratorio, para la remoción de endotoxinas en soluciones de inmunoglobulina. Se analizó la influencia de tres parámetros tecnológicos (concentración de proteínas, fuerza iónica y pH) en el comportami...
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| Published: |
Centro Nacional de Investigaciones Científicas
2023-07-01
|
| Series: | Revista CENIC. Ciencias Biológicas |
| Online Access: | https://revista.cnic.cu/index.php/RevBiol/article/view/4061 |
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| author | Héctor Borrero Larger Lorenzo Sánchez Gallardo |
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| description | Se evaluaron, dos alternativas cromatográficas de intercambio iónico en modo negativo, a escala de laboratorio, para la remoción de endotoxinas en soluciones de inmunoglobulina. Se analizó la influencia de tres parámetros tecnológicos (concentración de proteínas, fuerza iónica y pH) en el comportamiento de los dos principales criterios técnicos de eficiencia del procedimiento: 1. Capacidad de remoción en endotoxinas expresada como EU (unidades de endotoxinas) totales, 2. Recobrado de proteínas expresado como mg/proteína total. El objetivo principal del trabajo fue seleccionar variantes que cumplan el requisito regulatorio para las inmunoglobulinas intravenosas, que tiene que ser < 1 UE/mL. Se evaluó en la resina cromatográfica Fractogel-TMAE la incidencia de la concentración de proteínas y la fuerza iónica frente a una carga de endotoxinas conocida en el comportamiento de ambos criterios técnicos de eficiencia. La variante con una concentración de proteína cercana al 8%, sin refuerzo de fuerza iónica resultó la mejor opción. Como segunda alternativa para una carga de endotoxinas más baja, se evaluó para una membrana cromatográfica del tipo Sartobind-Q la incidencia del pH en el comportamiento de ambos criterios técnicos de eficiencia, manteniendo la concentración de proteínas alrededor de ~8%. En este caso la variante a pH=6,5 resultó la mejor opción integral. Para soluciones de inmunoglobulinas con concentración de proteína ≤ 8,0 %, ambas alternativas son eficaces hasta 4 volúmenes de columna, en cuanto a capacidad de remoción de endotoxinas y recobrado superior al 85 %, pues cumplen la exigencia regulatoria para las inmunoglobulinas intravenosas. |
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| publisher | Centro Nacional de Investigaciones Científicas |
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| spelling | doaj.art-c1dffa04991b44e4b424a30057ab1e6b2023-08-23T15:55:33ZengCentro Nacional de Investigaciones CientíficasRevista CENIC. Ciencias Biológicas0253-56882221-24502023-07-01541401574223ALTERNATIVAS CROMATOGRÁFICAS PARA LA REMOCIÓN DE ENDOTOXINAS RESIDUALES EN EL PROCESO DE PURIFICACIÓN DE INMUNOGLOBULINAS HUMANASHéctor Borrero Larger0Lorenzo Sánchez Gallardo1Empresa Laboratorios AICA. Biocubafarma.Empresa Laboratorios AICA. Biocubafarma.Se evaluaron, dos alternativas cromatográficas de intercambio iónico en modo negativo, a escala de laboratorio, para la remoción de endotoxinas en soluciones de inmunoglobulina. Se analizó la influencia de tres parámetros tecnológicos (concentración de proteínas, fuerza iónica y pH) en el comportamiento de los dos principales criterios técnicos de eficiencia del procedimiento: 1. Capacidad de remoción en endotoxinas expresada como EU (unidades de endotoxinas) totales, 2. Recobrado de proteínas expresado como mg/proteína total. El objetivo principal del trabajo fue seleccionar variantes que cumplan el requisito regulatorio para las inmunoglobulinas intravenosas, que tiene que ser < 1 UE/mL. Se evaluó en la resina cromatográfica Fractogel-TMAE la incidencia de la concentración de proteínas y la fuerza iónica frente a una carga de endotoxinas conocida en el comportamiento de ambos criterios técnicos de eficiencia. La variante con una concentración de proteína cercana al 8%, sin refuerzo de fuerza iónica resultó la mejor opción. Como segunda alternativa para una carga de endotoxinas más baja, se evaluó para una membrana cromatográfica del tipo Sartobind-Q la incidencia del pH en el comportamiento de ambos criterios técnicos de eficiencia, manteniendo la concentración de proteínas alrededor de ~8%. En este caso la variante a pH=6,5 resultó la mejor opción integral. Para soluciones de inmunoglobulinas con concentración de proteína ≤ 8,0 %, ambas alternativas son eficaces hasta 4 volúmenes de columna, en cuanto a capacidad de remoción de endotoxinas y recobrado superior al 85 %, pues cumplen la exigencia regulatoria para las inmunoglobulinas intravenosas.https://revista.cnic.cu/index.php/RevBiol/article/view/4061 |
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