PADRONIZAÇÃO DAS TÉCNICAS DE PCR CONVENCIONAL E PCR EM TEMPO REAL PARA DIAGNÓSTICO DE Candida albicans

Candida albicans é a espécie mais frequente em micoses hospitalares. O difícil diagnóstico relacionado com a baixa sensibilidade e o tempo longo para apresentação dos resultados são os principais fatores relacionados às recidivas e dificuldades na terapia. O objetivo desse estudo foi padronizar técn...

Full description

Bibliographic Details
Main Authors: Bruna Schwengber Lutz, Gabriela Kniphoff da Silva, Valeriano Antonio Corbelini, Jane Dagmar Pollo Renner, Lia Gonçalves Possuelo, Andréia Rosane de Moura Valim
Format: Article
Language:Portuguese
Published: Universidade de Santa Cruz do Sul 2013-07-01
Series:Revista Jovens Pesquisadores
Subjects:
Online Access:https://online.unisc.br/seer/index.php/jovenspesquisadores/article/view/3580
_version_ 1818935386888470528
author Bruna Schwengber Lutz
Gabriela Kniphoff da Silva
Valeriano Antonio Corbelini
Jane Dagmar Pollo Renner
Lia Gonçalves Possuelo
Andréia Rosane de Moura Valim
author_facet Bruna Schwengber Lutz
Gabriela Kniphoff da Silva
Valeriano Antonio Corbelini
Jane Dagmar Pollo Renner
Lia Gonçalves Possuelo
Andréia Rosane de Moura Valim
author_sort Bruna Schwengber Lutz
collection DOAJ
description Candida albicans é a espécie mais frequente em micoses hospitalares. O difícil diagnóstico relacionado com a baixa sensibilidade e o tempo longo para apresentação dos resultados são os principais fatores relacionados às recidivas e dificuldades na terapia. O objetivo desse estudo foi padronizar técnicas de PCR convencional e em tempo real (RT-PCR) e determinar a sensibilidade e especificidade na detecção de C. albicans. As extrações de DNA foram realizadas utilizando método in house. Os primers utilizados foram baseados na região NTS para a PCR convencional e na região espaçadora interna transcrita (ITS2) do gene de rRNA de C. albicans para a RT-PCR. A PCR convencional apresentou sensibilidade de 100 pg e baixa especificidade, sendo positiva também para a cepa de S. cerevisiae. A sensibilidade da RT-PCR foi de 0,1 fg e especificidade questionável. As duas técnicas tiveram tempo de execução menor em relação ao padrão-ouro. Concluímos que a PCR convencional apresentou limitações e a RT-PCR foi mais sensível na detecção de C. albicans. As técnicas devem ser aperfeiçoadas para testes com amostras clínicas, mas apresentam grande potencial no diagnóstico de C. albicans, visto que a sensibilidade, especificidade e tempo de execução se apresentam superiores à técnica padrão-ouro.
first_indexed 2024-12-20T05:19:21Z
format Article
id doaj.art-cd75b54eb5784f578336df3bd815a47a
institution Directory Open Access Journal
issn 2237-048X
language Portuguese
last_indexed 2024-12-20T05:19:21Z
publishDate 2013-07-01
publisher Universidade de Santa Cruz do Sul
record_format Article
series Revista Jovens Pesquisadores
spelling doaj.art-cd75b54eb5784f578336df3bd815a47a2022-12-21T19:52:05ZporUniversidade de Santa Cruz do SulRevista Jovens Pesquisadores2237-048X2013-07-013110.17058/rjp.v3i1.35801661PADRONIZAÇÃO DAS TÉCNICAS DE PCR CONVENCIONAL E PCR EM TEMPO REAL PARA DIAGNÓSTICO DE Candida albicansBruna Schwengber LutzGabriela Kniphoff da SilvaValeriano Antonio CorbeliniJane Dagmar Pollo RennerLia Gonçalves PossueloAndréia Rosane de Moura ValimCandida albicans é a espécie mais frequente em micoses hospitalares. O difícil diagnóstico relacionado com a baixa sensibilidade e o tempo longo para apresentação dos resultados são os principais fatores relacionados às recidivas e dificuldades na terapia. O objetivo desse estudo foi padronizar técnicas de PCR convencional e em tempo real (RT-PCR) e determinar a sensibilidade e especificidade na detecção de C. albicans. As extrações de DNA foram realizadas utilizando método in house. Os primers utilizados foram baseados na região NTS para a PCR convencional e na região espaçadora interna transcrita (ITS2) do gene de rRNA de C. albicans para a RT-PCR. A PCR convencional apresentou sensibilidade de 100 pg e baixa especificidade, sendo positiva também para a cepa de S. cerevisiae. A sensibilidade da RT-PCR foi de 0,1 fg e especificidade questionável. As duas técnicas tiveram tempo de execução menor em relação ao padrão-ouro. Concluímos que a PCR convencional apresentou limitações e a RT-PCR foi mais sensível na detecção de C. albicans. As técnicas devem ser aperfeiçoadas para testes com amostras clínicas, mas apresentam grande potencial no diagnóstico de C. albicans, visto que a sensibilidade, especificidade e tempo de execução se apresentam superiores à técnica padrão-ouro.https://online.unisc.br/seer/index.php/jovenspesquisadores/article/view/3580Candida albicansDiagnósticoPCR convencionalRT-PCR.
spellingShingle Bruna Schwengber Lutz
Gabriela Kniphoff da Silva
Valeriano Antonio Corbelini
Jane Dagmar Pollo Renner
Lia Gonçalves Possuelo
Andréia Rosane de Moura Valim
PADRONIZAÇÃO DAS TÉCNICAS DE PCR CONVENCIONAL E PCR EM TEMPO REAL PARA DIAGNÓSTICO DE Candida albicans
Revista Jovens Pesquisadores
Candida albicans
Diagnóstico
PCR convencional
RT-PCR.
title PADRONIZAÇÃO DAS TÉCNICAS DE PCR CONVENCIONAL E PCR EM TEMPO REAL PARA DIAGNÓSTICO DE Candida albicans
title_full PADRONIZAÇÃO DAS TÉCNICAS DE PCR CONVENCIONAL E PCR EM TEMPO REAL PARA DIAGNÓSTICO DE Candida albicans
title_fullStr PADRONIZAÇÃO DAS TÉCNICAS DE PCR CONVENCIONAL E PCR EM TEMPO REAL PARA DIAGNÓSTICO DE Candida albicans
title_full_unstemmed PADRONIZAÇÃO DAS TÉCNICAS DE PCR CONVENCIONAL E PCR EM TEMPO REAL PARA DIAGNÓSTICO DE Candida albicans
title_short PADRONIZAÇÃO DAS TÉCNICAS DE PCR CONVENCIONAL E PCR EM TEMPO REAL PARA DIAGNÓSTICO DE Candida albicans
title_sort padronizacao das tecnicas de pcr convencional e pcr em tempo real para diagnostico de candida albicans
topic Candida albicans
Diagnóstico
PCR convencional
RT-PCR.
url https://online.unisc.br/seer/index.php/jovenspesquisadores/article/view/3580
work_keys_str_mv AT brunaschwengberlutz padronizacaodastecnicasdepcrconvencionalepcremtemporealparadiagnosticodecandidaalbicans
AT gabrielakniphoffdasilva padronizacaodastecnicasdepcrconvencionalepcremtemporealparadiagnosticodecandidaalbicans
AT valerianoantoniocorbelini padronizacaodastecnicasdepcrconvencionalepcremtemporealparadiagnosticodecandidaalbicans
AT janedagmarpollorenner padronizacaodastecnicasdepcrconvencionalepcremtemporealparadiagnosticodecandidaalbicans
AT liagoncalvespossuelo padronizacaodastecnicasdepcrconvencionalepcremtemporealparadiagnosticodecandidaalbicans
AT andreiarosanedemouravalim padronizacaodastecnicasdepcrconvencionalepcremtemporealparadiagnosticodecandidaalbicans