Підбір умов для спектрофотометричного визначення активності параоксонази з 4-нітрофенілацетатом у плазмі та печінці мишей

Параоксонази - це група ферментів ссавців з арилдиалкілфосфатазною активністю, і найбільш вивченою з праоксоназ є параоксоназа 1 (PON 1). Параоксоназа 1 вперше була описана у 1940-х роках як фермент, виявлений у тканинах ссавців, здатний гідролізувати фосфорорганічні пестициди. Однак останні дослідж...

Full description

Bibliographic Details
Main Authors: Myroslava Vatashchuk, Viktoria Hurza, Maria Bayliak
Format: Article
Language:English
Published: Vasyl Stefanyk Precarpathian National University 2023-01-01
Series:Journal of Vasyl Stefanyk Precarpathian National University
Subjects:
Online Access:https://journals.pnu.edu.ua/index.php/jpnu/article/view/6610
_version_ 1797808911770714112
author Myroslava Vatashchuk
Viktoria Hurza
Maria Bayliak
author_facet Myroslava Vatashchuk
Viktoria Hurza
Maria Bayliak
author_sort Myroslava Vatashchuk
collection DOAJ
description Параоксонази - це група ферментів ссавців з арилдиалкілфосфатазною активністю, і найбільш вивченою з праоксоназ є параоксоназа 1 (PON 1). Параоксоназа 1 вперше була описана у 1940-х роках як фермент, виявлений у тканинах ссавців, здатний гідролізувати фосфорорганічні пестициди. Однак останні дослідження показали, що PON 1 також відіграє захисну роль при захворюваннях, пов’язаних із запаленням і оксидативним стресом та виявляє протизапальні, антиоксидантні, антиатерогенні, антидіабетичні, антимікробні та детоксикаційні властивості. Зокрема, PON 1 важлива для захисту від судинних захворювань, оскільки метаболізує окислені ліпіди у складі ліпопротеїдних комплексів крові. Деякі дослідження показують, що знижена активність PON 1 пов’язана з ризиком розвитку серцево-судинних захворювань, а також ожиріння, метаболічного синдрому та раку. Тому визначення активності параоксонази можна вважати важливим біомаркером у діагностиці вищевказаних захворювань. У цій роботі ми оптимізували умови спектрофотометричного визначення активності параоксанази в крові та печінці мишей. Адаптовано протокол для визначення арилестеразної активності PON1 з використанням нітрофенілацетату як субстрату. Концентрація нітрофенілацетату 3,2 ммоль/л була обрана для визначення параоксонази в тканинах мишей. Питома активність PON 1 у цих тканинах була різною - 210±17 мОд/мг у плазмі крові та 66,5±8,5 мОд/мг у супернатанті печінки. Рекомендований об'єм надосадової рідини для визначення PON 1 становить 5 мкл для плазми та 10 мкл для печінки в реакційній суміші загальним об'ємом 1,25 мл.
first_indexed 2024-03-13T06:44:43Z
format Article
id doaj.art-dbae7f66e9f8459fa63e12e23965de9e
institution Directory Open Access Journal
issn 2311-0155
2413-2349
language English
last_indexed 2024-03-13T06:44:43Z
publishDate 2023-01-01
publisher Vasyl Stefanyk Precarpathian National University
record_format Article
series Journal of Vasyl Stefanyk Precarpathian National University
spelling doaj.art-dbae7f66e9f8459fa63e12e23965de9e2023-06-08T08:12:37ZengVasyl Stefanyk Precarpathian National UniversityJournal of Vasyl Stefanyk Precarpathian National University2311-01552413-23492023-01-019461410.15330/jpnu.9.4.6-146610Підбір умов для спектрофотометричного визначення активності параоксонази з 4-нітрофенілацетатом у плазмі та печінці мишейMyroslava Vatashchuk0Viktoria Hurza1Maria Bayliak2Прикарпатський національний університет імені Василя СтефаникаПрикарпатський національний університет імені Василя СтефаникаПрикарпатський національний університет імені Василя СтефаникаПараоксонази - це група ферментів ссавців з арилдиалкілфосфатазною активністю, і найбільш вивченою з праоксоназ є параоксоназа 1 (PON 1). Параоксоназа 1 вперше була описана у 1940-х роках як фермент, виявлений у тканинах ссавців, здатний гідролізувати фосфорорганічні пестициди. Однак останні дослідження показали, що PON 1 також відіграє захисну роль при захворюваннях, пов’язаних із запаленням і оксидативним стресом та виявляє протизапальні, антиоксидантні, антиатерогенні, антидіабетичні, антимікробні та детоксикаційні властивості. Зокрема, PON 1 важлива для захисту від судинних захворювань, оскільки метаболізує окислені ліпіди у складі ліпопротеїдних комплексів крові. Деякі дослідження показують, що знижена активність PON 1 пов’язана з ризиком розвитку серцево-судинних захворювань, а також ожиріння, метаболічного синдрому та раку. Тому визначення активності параоксонази можна вважати важливим біомаркером у діагностиці вищевказаних захворювань. У цій роботі ми оптимізували умови спектрофотометричного визначення активності параоксанази в крові та печінці мишей. Адаптовано протокол для визначення арилестеразної активності PON1 з використанням нітрофенілацетату як субстрату. Концентрація нітрофенілацетату 3,2 ммоль/л була обрана для визначення параоксонази в тканинах мишей. Питома активність PON 1 у цих тканинах була різною - 210±17 мОд/мг у плазмі крові та 66,5±8,5 мОд/мг у супернатанті печінки. Рекомендований об'єм надосадової рідини для визначення PON 1 становить 5 мкл для плазми та 10 мкл для печінки в реакційній суміші загальним об'ємом 1,25 мл.https://journals.pnu.edu.ua/index.php/jpnu/article/view/6610параоксоназа 1, спектрофотометричний метод, 4-нітрофенілацетат, плазма, печінка, миші
spellingShingle Myroslava Vatashchuk
Viktoria Hurza
Maria Bayliak
Підбір умов для спектрофотометричного визначення активності параоксонази з 4-нітрофенілацетатом у плазмі та печінці мишей
Journal of Vasyl Stefanyk Precarpathian National University
параоксоназа 1, спектрофотометричний метод, 4-нітрофенілацетат, плазма, печінка, миші
title Підбір умов для спектрофотометричного визначення активності параоксонази з 4-нітрофенілацетатом у плазмі та печінці мишей
title_full Підбір умов для спектрофотометричного визначення активності параоксонази з 4-нітрофенілацетатом у плазмі та печінці мишей
title_fullStr Підбір умов для спектрофотометричного визначення активності параоксонази з 4-нітрофенілацетатом у плазмі та печінці мишей
title_full_unstemmed Підбір умов для спектрофотометричного визначення активності параоксонази з 4-нітрофенілацетатом у плазмі та печінці мишей
title_short Підбір умов для спектрофотометричного визначення активності параоксонази з 4-нітрофенілацетатом у плазмі та печінці мишей
title_sort підбір умов для спектрофотометричного визначення активності параоксонази з 4 нітрофенілацетатом у плазмі та печінці мишей
topic параоксоназа 1, спектрофотометричний метод, 4-нітрофенілацетат, плазма, печінка, миші
url https://journals.pnu.edu.ua/index.php/jpnu/article/view/6610
work_keys_str_mv AT myroslavavatashchuk pídbírumovdlâspektrofotometričnogoviznačennâaktivnostíparaoksonaziz4nítrofenílacetatomuplazmítapečíncímišej
AT viktoriahurza pídbírumovdlâspektrofotometričnogoviznačennâaktivnostíparaoksonaziz4nítrofenílacetatomuplazmítapečíncímišej
AT mariabayliak pídbírumovdlâspektrofotometričnogoviznačennâaktivnostíparaoksonaziz4nítrofenílacetatomuplazmítapečíncímišej